Immunoassay-Bluttest In Der Parasitologie

2023 Autor: Riley Dean | [email protected]. Zuletzt bearbeitet: 2023-08-25 08:38

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay wird durchgeführt, wenn Schwierigkeiten bei der Diagnose auftreten, wenn der Patient eine erbliche Veranlagung für bestimmte Krankheiten hat, um die Wirksamkeit der Behandlung zu beurteilen. ELISA ist ein moderner Labortest, mit dessen Hilfe bestimmte Antikörper im Blut für bestimmte Krankheiten identifiziert werden können. Die Methode ist sehr spezifisch und empfindlich.

Der Inhalt des Artikels:

1 Immunoassay
2 Grundlegende Konzepte und Prinzipien der Enzymimmunoassay-Methode
3 Verschiedene Klassen von Antikörpern IgG, IgM, IgA
- 3.1 IgM-Antikörper
- 3.2 IgG-Antikörper
- 3.3 IgA-Antikörper
4 Vorteile der Methode
5 Nachteile der Methode
6 Indikationen für die Ernennung und nachweisbare Krankheiten
7 Das analysierte Biomaterial und die Merkmale seiner Sammlung
8 Zeitpunkt der Bereitschaft der ELISA-Ergebnisse
9 Interpretation des Enzymimmunoassays
10 Mögliche ELISA-Ergebnisse
11 Abschließend

Verknüpfter Immunosorbens-Assay

Die Analyse zeigt Antigene, die für bestimmte Krankheitserreger charakteristisch sind, und Antikörper gegen diese. Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay basiert auf der Reaktion der Wechselwirkung eines Antigens mit einem spezifischen Antikörper, wodurch ein Komplex gebildet wird, dessen Zusammensetzung eine spezielle Markierung aufweist, die die Farbe der Probe unter Einwirkung des Reagenz ändert.

Die Intensität der Färbung ermöglicht es, das Vorhandensein von Antikörpern oder Antigenen zu beurteilen, die für eine bestimmte Infektion charakteristisch sind, und bereits mit Hilfe der Ausrüstung wird deren Menge bestimmt. Antigene sind Fremdsubstanzen, die eine Immunabwehrreaktion im Körper auslösen. Es werden körperspezifische Proteine (Immunglobuline) produziert.

Jeder Erreger hat seinen eigenen Satz von Antigenen, und die Immunantwort auf diese ist ebenfalls spezifisch. Das Hauptmaterial für die Analyse ist Blut aus einer Vene.

Ein enzymgebundener Immunosorbens-Assay ermöglicht es, latente Erkrankungen frühzeitig mit hoher Genauigkeit zu identifizieren, den Arzt über den Allgemeinzustand des Patienten und über die Risiken der Entwicklung von Pathologien sowie über den Zustand der reproduktiven Gesundheit zu informieren.

Eine Analyse wird durchgeführt, um Viruserkrankungen zu diagnostizieren: Herpes, Hepatitis, Cytomegalievirus, Epstein-Barr-Virus usw., sexuell übertragbare Infektionen: Gonorrhoe, Ureaplasma, Chlamydose, Mycoplasma, Trichomonas, Syphilis, um Hormonspiegel zu bestimmen, Krebs zu diagnostizieren und Immunschwäche, Erkennung und Behandlung von Allergien. Für die Analyse können Sie neben Blut auch Liquor cerebrospinalis, Fruchtwasser und den Inhalt des Glaskörpers entnehmen.

Die Analyse setzt die Verwendung einer Gruppe von ELI-Tests voraus:

ELI-B-Test, mit dem Rückschlüsse auf den Zustand des Immunsystems gezogen werden können;
ELI-Dia-Test, der den Zustand des endokrinen Systems bestimmt. Mit seiner Hilfe wird Diabetes des ersten und zweiten Typs diagnostiziert;
ELI-N-Complex-12, der über den Zustand des peripheren und zentralen Nervensystems informiert;
ELI-Ankor-Test-12, eine Analyse, die den Zustand des Herzens und der Blutgefäße bewertet, bewertet das Risiko für Schlaganfall, Herzinfarkt;
ELI-Viscero-16 wird durchgeführt, um den Allgemeinzustand des Patienten zu beurteilen. Dieser Test bietet Diagnosen für 16 Indikatoren: Darm, Nervensystem, Myokard, Nieren, Immunsystem, Leber, Magen usw.;
ELI-P-Komplex-12 wird durchgeführt, um die Fortpflanzungsfähigkeit des Körpers zu bewerten;
ELI-GIT-12 - eine Analyse, die den Zustand des Magen-Darm-Trakts bewertet und es ermöglicht, das Risiko der Entwicklung von Pathologien vorherzusagen;
Der ELI-HCG-APS-Test zeigt Störungen der reproduktiven Gesundheit.

Grundlegende Konzepte und Prinzipien der Enzymimmunoassay-Methode

Der ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) ist eine labordiagnostische Methode, die auf der Antigen-Antikörper-Reaktion basiert und die Identifizierung von Proteinsubstanzen (einschließlich Enzymen, Viren, Bakterienfragmenten und anderen Bestandteilen biologischer Flüssigkeiten) ermöglicht. Um zu verstehen, wie der Enzymimmunoassay funktioniert, versuchen wir, die Essenz der "Antigen-Antikörper" -Reaktion zu verstehen. Ein Antigen ist ein körpereigenes Molekül, das normalerweise aus Proteinen stammt und zusammen mit einem Infektionserreger in den menschlichen Körper gelangen kann.

Partikel des Blutes eines anderen (wenn es nicht zu unserer Gruppe passt) sind ebenfalls Antigene. Im Körper können Antigene eine Immunantwort auslösen, die darauf abzielt, die Integrität der inneren Umgebung vor fremden Substanzen zu schützen. Daher synthetisiert unser Körper spezielle Substanzen - Antikörper (Immunglobuline), die in der Lage sind, sich nach dem Prinzip des "Key to Lock" mit Antigenen zu verbinden und diese zu einem Immunkomplex zu binden (dieser Prozess wird als "Antigen-Antikörper" -Reaktion bezeichnet).

Verknüpfter Immunosorbens-Assay. Solche Immunkomplexe werden von Immunzellen leichter erkannt und zerstört. Es gibt verschiedene Arten von Antikörpern, von denen jeder in einem bestimmten Stadium der Immunantwort wirksam wird. Somit werden Immunglobuline der Klasse M (IgM) zuerst als Reaktion auf das Eindringen eines Antigens in den Körper synthetisiert.

Der Gehalt dieser Antikörper ist in den frühen Tagen des Infektionsprozesses am höchsten. Anschließend setzt das Immunsystem Immunglobuline der Klasse G (IgG) in das Blut frei, die dazu beitragen, Antigene zu zerstören, bis die Infektion vollständig besiegt ist, und auch in Zukunft durch die Gefäße zirkulieren und so eine Immunität gegen eine erneute Infektion bieten.

Die Impfung basiert auf diesem Phänomen: Dank Impfungen mit geschwächten Antigenen von Mikroben und Viren erscheint eine große Menge IgG in unserem Blut, die bei Kontakt mit einer echten Bedrohung die Infektion schnell unterdrückt - bevor sie die Gesundheit schädigt. Es gibt auch Immunglobuline der Klasse A (sie kommen in großen Mengen in den Schleimhäuten vor und schützen die "Annäherungen" an den Körper), E (Bekämpfung parasitärer Infektionen) und andere.

In der Labordiagnostik sind die interessierenden Objekte meistens IgM, IgG und IgA: Durch ihre Konzentration kann beurteilt werden, in welchem Stadium sich der Infektionsprozess befindet, und es kann auch herausgefunden werden, ob eine Person jemals an der einen oder anderen Krankheit (z. B. Röteln oder Windpocken) erkrankt ist. Woher wissen Sie, welche Antigene oder Antikörper im menschlichen Körper vorhanden sind? Wenn ein Arzt den Verdacht hat, dass eine bestimmte Infektion die Ursache der Krankheit ist oder die Konzentration eines bestimmten Hormons messen möchte, verschreibt er dem Patienten einen Enzymimmunoassay.

Die "Antigen-Antikörper" -Reaktion kann unter Laborbedingungen reproduziert werden: Verwenden Sie vorgefertigte Antikörper oder Antigene, um festzustellen, ob die entsprechende Verbindung in der untersuchten Probe vorhanden ist. Zuerst müssen Sie eine Probe biologischer Flüssigkeit entnehmen - normalerweise Blutserum. Das Labor verwendet Kunststoffplatten mit Vertiefungen, die bereits gereinigte Antigene des vermuteten Pathogens enthalten (oder Antikörper, wenn die Aufgabe darin besteht, nach einem Antigen zu suchen).

Die Proben werden in Vertiefungen gegeben, in denen - oder nicht - Immunkomplexe gebildet werden. Wenn das "Treffen" stattgefunden hat, geht ein bestimmter Farbstoff eine enzymatische Reaktion mit dem kombinierten Molekül ein, die es ermöglicht, unter Verwendung einer instrumentellen optischen Dichtebewertung eine Schlussfolgerung über die Analyseergebnisse zu ziehen.

ELISA ist qualitativ und quantitativ. Im ersten Fall wird eine eindeutige Antwort impliziert: Die gewünschte Substanz wird entweder in der Probe gefunden oder nicht.

Bei der quantitativen Analyse ermöglicht eine komplexere Reaktionskette die Beurteilung der Antikörperkonzentration im menschlichen Blut, die im Vergleich zu den Ergebnissen früherer Tests die Frage beantwortet, wie sich der Infektionsprozess entwickelt. Interessanterweise war der Vorläufer des Enzymimmunoassays der Radioimmunoassay, bei dem markierte Antikörper und Antigene verwendet wurden, um eine erfolgreiche Reaktion zu identifizieren. Da die Durchführung solcher Diagnosen eine potenzielle Gefahr für die Gesundheit des Laborpersonals darstellte, suchten die Wissenschaftler nach einer sicheren Alternative, um die Proben zu „färben“. So wurde 1971 die IFA erfunden.

Verschiedene Klassen von Antikörpern IgG, IgM, IgA

Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay erkennt Antikörper von Infektionen, die zu verschiedenen Ig-Klassen gehören (G, A, M). Antikörper gegen das Virus werden in Gegenwart einer Infektion sehr früh bestimmt, was eine wirksame Diagnose und Kontrolle des Krankheitsverlaufs gewährleistet. Die gebräuchlichsten Methoden zur Diagnose von Infektionen sind Tests auf IgM-Antikörper (akute Infektionsphase) und IgG-Antikörper (infektionsresistent). Diese Antikörper werden für die meisten Infektionen bestimmt.

Einer der häufigsten Tests - das Krankenhaus-Screening (Tests auf HIV, Syphilis und Hepatitis B und C) - unterscheidet jedoch nicht die Art der Antikörper, da das Vorhandensein von Antikörpern gegen die Viren dieser Infektionen automatisch auf einen chronischen Krankheitsverlauf hinweist und beispielsweise eine Kontraindikation für schwerwiegende chirurgische Eingriffe darstellt. Daher ist es wichtig, die Diagnose zu widerlegen oder zu bestätigen.

Verknüpfter Immunosorbens-Assay. Eine detaillierte Diagnose der Art und Menge der Antikörper bei einer diagnostizierten Krankheit kann durch Bestehen einer Analyse für jede spezifische Infektion und Art der Antikörper erfolgen. Eine Primärinfektion wird festgestellt, wenn in einer Blutprobe ein diagnostisch signifikanter Gehalt an IgM-Antikörpern oder ein signifikanter Anstieg der Anzahl von IgA- oder IgG-Antikörpern in gepaarten Seren im Abstand von 1 bis 4 Wochen festgestellt wird.

Eine Reinfektion oder erneute Infektion wird durch einen raschen Anstieg der IgA- oder IgG-Antikörperspiegel festgestellt. IgA-Antikörper sind bei älteren Patienten höher und diagnostizieren die aktuelle Infektion bei Erwachsenen genauer.

Eine frühere Infektion im Blut ist definiert als erhöhte IgG-Antikörper ohne Erhöhung ihrer Konzentration in gepaarten Proben, die im Abstand von 2 Wochen entnommen wurden. In diesem Fall gibt es keine Antikörper gegen IgM und A.

IgM-Antikörper

Ihre Konzentration steigt bald nach der Krankheit. IgM-Antikörper werden bereits 5 Tage nach ihrem Einsetzen nachgewiesen und erreichen im Intervall von einer bis vier Wochen einen Höhepunkt. Dann fallen sie auch ohne Behandlung innerhalb einiger Monate auf diagnostisch unbedeutende Werte ab. Für eine vollständige Diagnose reicht es jedoch nicht aus, nur Antikörper der Klasse M zu bestimmen: Das Fehlen dieser Klasse von Antikörpern bedeutet nicht das Fehlen der Krankheit. Es gibt keine akute Form der Krankheit, aber sie kann chronisch sein.

IgM-Antikörper sind von großer Bedeutung für die Diagnose von Hepatitis A und Infektionen im Kindesalter (Röteln, Keuchhusten, Windpocken), die leicht durch Tröpfchen in der Luft übertragen werden können, da es wichtig ist, die Krankheit so früh wie möglich zu identifizieren und die kranke Person zu isolieren.

IgG-Antikörper

Die Hauptaufgabe von IgG-Antikörpern ist der langfristige Schutz des Körpers gegen die meisten Bakterien und Viren - obwohl ihre Produktion langsamer erfolgt, bleibt die Reaktion auf einen antigenen Stimulus stabiler als die von Antikörpern der IgM-Klasse.

Verknüpfter Immunosorbens-Assay. Die IgG-Antikörperspiegel steigen langsamer (15 bis 20 Tage nach Ausbruch der Krankheit) als die von IgM, bleiben jedoch länger erhöht, sodass sie in Abwesenheit von IgM-Antikörpern eine langjährige Infektion aufweisen können. Die IgG-Spiegel können viele Jahre lang niedrig sein, aber bei wiederholter Exposition gegenüber demselben Antigen steigen die IgG-Antikörperspiegel schnell an.

Für ein vollständiges diagnostisches Bild müssen IgA- und IgG-Antikörper gleichzeitig bestimmt werden. Wenn das IgA-Ergebnis unklar ist, Bestätigung durch IgM-Bestimmung. Im Falle eines positiven Ergebnisses und für eine genaue Diagnose sollte ein zweiter Test, der 8 bis 14 Tage nach dem ersten durchgeführt wird, parallel überprüft werden, um den Anstieg der IgG-Konzentration zu bestimmen. Die Ergebnisse der Analyse sollten in Verbindung mit den Informationen interpretiert werden, die in anderen Diagnoseverfahren erhalten wurden.

Insbesondere IgG-Antikörper werden zur Diagnose von Helicobacter pylori verwendet, einer der Ursachen für Geschwüre und Gastritis.

IgA-Antikörper

Sie treten 10 bis 14 Tage nach Ausbruch der Krankheit im Serum auf und sind zunächst sogar in Samen- und Vaginalflüssigkeiten zu finden. Die IgA-Antikörperspiegel sinken normalerweise 2-4 Monate nach der Infektion, wenn die Behandlung erfolgreich ist. Bei erneuter Infektion steigt der IgA-Antikörperspiegel wieder an. Wenn der IgA-Spiegel nach der Behandlung nicht abfällt, ist dies ein Zeichen für eine chronische Form der Infektion.

Methodenvorteile

Die unbestreitbaren Vorteile des ELISA sind die hohe Empfindlichkeit und Spezifität der Methode. Empfindlichkeit ist die Fähigkeit, die Zielsubstanz zu erkennen, selbst wenn ihre Konzentration in der Probe gering ist. Die Spezifität impliziert andererseits eine fehlerfreie Diagnose: Wenn das Ergebnis positiv ist, bedeutet dies, dass genau der angenommene Antikörper oder das Antigen gefunden wurde und nicht einige andere.

Der enzymgebundene Immunosorbens-Assay hat den "Goldstandard" der Mikrobiologie weitgehend ersetzt - eine bakteriologische Diagnosemethode, bei der zur Identifizierung eines Krankheitserregers dieser aus dem Körper isoliert und die Kultur dann mehrere Tage lang auf einem Nährmedium in einem Reagenzglas gezüchtet werden musste. Während der Analyse waren die Ärzte gezwungen, den Patienten "blind" zu behandeln und den Ursprung des Mikroorganismus anhand der Krankheitssymptome zu erraten.

Die Bestimmung von IgM mittels ELISA ermöglicht es Ihnen, bereits in den ersten Tagen der Krankheit eine genaue Diagnose zu stellen. Der hohe Grad an Herstellbarkeit des Enzymimmunoassays minimiert den Einfluss des menschlichen Faktors, wodurch die Fehlerwahrscheinlichkeit verringert wird. Die meisten ELISA-Testkits und Reagenzien, die in modernen Labors verwendet werden, werden in einer industriellen Umgebung hergestellt, was ein genaues Ergebnis garantiert.

Nachteile der Methode

Um einen ELISA durchführen zu können, müssen Sie leider genau wissen, wonach Sie suchen müssen: Die Analysetechnik impliziert, dass der Arzt im Voraus eine Annahme über die Art der Krankheit hat. Daher ist es nicht sinnvoll, einen solchen Test in der Hoffnung zu verschreiben, die Diagnose versehentlich zu "erraten". Bei der Diagnose von Infektionskrankheiten kann der Enzymimmunoassay den Erreger nicht finden und seine spezifischen Eigenschaften nicht bestimmen: Er zeigt nur das Vorhandensein von Antikörpern im Blut des Patienten an, was indirekt auf das Vorhandensein eines fremden Mikroorganismus im menschlichen Körper hinweist.

ELISA ist eine äußerst genaue, aber nicht billige Methode. Sie müssen sie daher mit Bedacht anwenden, und ein qualifizierter Arzt sollte die Ergebnisse interpretieren.

Indikationen für die Ernennung und erkannte Krankheiten

Es ist unmöglich, die vollständige Liste der Indikationen für ELISA abzudecken. Die häufigsten Zwecke der Analyse sind: Diagnose von akuten und chronischen Infektionskrankheiten:

IgM und IgG gegen virale Hepatitis A, B, C, E sowie Hepatitis B- und C-Antigene;
IgG gegen HIV; Ig M und IgG gegen Cytomegalievirus-Infektion;
Ig M und IgG gegen das Epstein-Barr-Virus; Ig M und IgG gegen Herpesinfektionen;
Ig M und IgG gegen Toxoplasmose;
Ig M und IgG gegen Masern, Röteln, Salmonellose, Ruhr, durch Zecken übertragene Enzephalitis und andere Krankheiten;
IgG gegen parasitäre Krankheiten;
Ig M und IgG zu sexuell übertragbaren Infektionen;
IgG gegen Helicobacter pylori-Infektion.

Allgemeine Bewertung von Indikatoren für die Immunität des Menschen und Markern einiger Autoimmunerkrankungen. Identifizierung von onkologischen Markern (Tumornekrosefaktor, Prostata-spezifisches Antigen, krebsembryonales Antigen und andere). Bestimmung des Hormongehalts im Blutserum (Progesteron, Prolaktin, Testosteron, Schilddrüsen-stimulierendes Hormon und andere).

Das analysierte Biomaterial und die Merkmale seiner Sammlung

Das Hauptbiomaterial für den ELISA ist das Blutserum: Im Labor wird dem Patienten eine Blutprobe aus einer Vene entnommen, aus der die Formelemente, die die Analyse erschweren, weiter entfernt werden. In einigen anderen Fällen werden Liquor cerebrospinalis, Fruchtwasser, Schleimhautabstriche usw. zur Analyse verwendet.

Um Verzerrungen in den Ergebnissen zu vermeiden, wird empfohlen, Blut auf leeren Magen zu spenden. Zwei Wochen vor der Studie (wenn das Ziel darin besteht, chronische, latente Infektionskrankheiten zu diagnostizieren) muss die Einnahme von Antibiotika und antiviralen Medikamenten abgebrochen werden. Bereitschaftsbedingungen für ELISA-Ergebnisse Wenn Sie über die erforderlichen Reagenzien und eine gute Organisation des Labors verfügen, erhalten Sie das Testergebnis innerhalb von 1–2 Tagen nach der Blutentnahme. In einigen Fällen kann dieser Zeitraum auf 2-3 Stunden verkürzt werden, wenn eine Notfallreaktion erforderlich ist.

Die IFA-Ergebnisse liegen vor

Wenn Sie über die erforderlichen Reagenzien und eine gute Organisation des Labors verfügen, erhalten Sie das Testergebnis innerhalb von 1–2 Tagen nach der Blutentnahme. In einigen Fällen kann dieser Zeitraum auf 2-3 Stunden verkürzt werden, wenn eine Notfallreaktion erforderlich ist.

Dekodierung des Enzymimmunoassays

Das Ergebnis eines hochwertigen ELISA ist ein eindeutiges Urteil: Die gewünschte Substanz wird entweder in der Probe gefunden oder nicht. Wenn es sich um eine quantitative Analyse handelt, kann die Konzentration als numerischer Wert oder als bestimmte Anzahl von "+" - Zeichen (von einem bis mehreren) ausgedrückt werden.

Analysierte Indikatoren:

IgM - das Vorhandensein dieser Klasse von Immunglobulinen weist auf einen akuten Infektionsprozess im Körper hin. Das Fehlen von IgM kann sowohl auf das Fehlen eines bestimmten Pathogens im Körper als auch auf den Übergang der Infektion in das chronische Stadium hinweisen.
IgA mit einem negativen IgM-Test weist meist auf eine chronische oder latente Infektion hin. IgM und IgA (Gelenkpräsenz) - zwei positive Ergebnisse zeigen die Höhe der akuten Phase der Krankheit an.
IgG spricht entweder über die Chronizität der Krankheit oder über die Genesung und die Entwicklung einer Immunität gegen einen Infektionserreger.

Mögliche ELISA-Ergebnisse

Abhängig vom Inhalt der Analyse kann das Formular Daten in Form einer Tabelle enthalten, in der alle Antikörper oder Antigene mit Hinweisen zu einer negativen oder positiven Reaktion aufgeführt sind, oder der quantitative Wert des Ergebnisses (negativ, schwach positiv, positiv oder scharf positiv) wird angegeben. Die letztere Option bestimmt, wie viele Antikörper in der analysierten Probe enthalten sind. Ein weiterer quantitativer Indikator ist der Antikörper-Aviditätsindex, ausgedrückt als Prozentsatz.

Es zeigt an, wie viel Zeit seit Beginn des Infektionsprozesses vergangen ist (je höher der Index, desto mehr).

Heute werden Tausende von Arten von ELISA-Testsystemen hergestellt, die den Nachweis spezifischer Antikörper und Antigene in einer Vielzahl von Pathologien ermöglichen.

Daher wird diese Analyse in fast allen medizinischen Branchen verwendet. Die mit Hilfe des ELISA gestellte Diagnose ist eine Garantie für die Ernennung einer angemessenen Therapie und eine wirksame Behandlung der Krankheit.

Abschließend

Wenn Patienten in den Testergebnissen IgG-Antikörper gefunden haben, z. B. Toxoplasmose oder Herpes, geraten sie manchmal in Panik, ohne die Tatsache zu berücksichtigen, dass IgM-Antikörper, die auf das Vorhandensein einer aktuellen Infektion hinweisen, möglicherweise überhaupt nicht vorhanden sind. In diesem Fall spricht die Analyse von einer früheren Infektion, gegen die sich eine Immunität entwickelt hat.

In jedem Fall ist es besser, die Interpretation der Analyseergebnisse dem Arzt anzuvertrauen und gegebenenfalls mit ihm die Behandlungstaktik zu bestimmen.

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